期刊简介

本杂志1995年创刊,由中国预防医学科学院和卫生部疾病控制司联合主办,为国内外公开发行的唯一专门报道计划免疫专业的学术刊物。双月刊,大16开本。主要登载国内外计划免疫、疫苗可预防疾病的免疫预防和疫苗研究的成果,计划免疫管理,实验室技术和方法,国内外有关计划免疫的学术信息。主要栏目有述评、论著、管理、经验交流、短篇报道、综述、讲座、学术报告、学术讨论、专家访谈、文摘。

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  • 杂志名称:中国疫苗和免疫杂志
  • 主管单位:中国计划免疫
  • 主办单位:中华人民共和国卫生和计划生育委员会
  • 国际刊号:11-5517/R
  • 国内刊号:11-5517/R
  • 出版周期:双月刊
期刊荣誉:中国期刊全文数据库(CJFD)期刊收录:维普收录(中), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 文摘与引文数据库, CA 化学文摘(美), 国家图书馆馆藏, 知网收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 上海图书馆馆藏, 万方收录(中)
中国疫苗和免疫杂志2011年第01期

流行性乙型脑炎病毒非结构蛋白1基因的克隆及其在昆虫细胞中的表达

谢荣辉;程胤凯;朱函坪;翁景清;徐芳;姚苹苹;朱智勇

关键词:流行性乙型脑炎病毒, 非结构蛋白1, 克隆, 表达
摘要:目的 获得流行性乙型脑炎(乙脑)病毒非结构蛋白1(Non-structural Protein 1,NS1)基因并在昆虫细胞中表达,为研制乙脑病毒基因工程疫苗奠定基础.方法 逆转录-聚合酶链反应扩增乙脑病毒NS1基因并测序列,定向克隆入杆状病毒(Baculovirus,BV)转移载体pFastBac HTa,获得重组转移载体pFastBac-NS1.并将pFastBac-NS1转化到DH1OBac感受态细胞中,筛选到重组转座子rBacmid-NS1.在脂质体介导下将rBacmid-NS1 转染粉蚊夜蛾(Trichoplusia ni,TN)细胞获得重组BV(rBV-NSI).rBV-NS1感染TN细胞后,通过十二烷基硫酸钠-聚丙烯酞胺凝胶电泳(Sodium Dodecyl Sulfate-Polyacryamide Gel Eleetrophoresis,SDS-PAG)、间接免疫荧光试验(Indirect Immunofluorescence Assay,IFA)和蛋白质印迹法(Western blotting,WB)检测NS1 重组蛋白.结果 成功克隆乙脑病毒NS1 基因,SDS-PAGE、IFA和WB检测表明,NS1基因在昆虫细胞得到表达,能与乙脑患者血清发生特异性免疫反应,具有免疫原性.结论 乙脑病毒NS1 在昆虫细胞中表达,为研究NS1 的生物学特性和研制基因工程疫苗奠定了基础.