期刊简介

本杂志1995年创刊,由中国预防医学科学院和卫生部疾病控制司联合主办,为国内外公开发行的唯一专门报道计划免疫专业的学术刊物。双月刊,大16开本。主要登载国内外计划免疫、疫苗可预防疾病的免疫预防和疫苗研究的成果,计划免疫管理,实验室技术和方法,国内外有关计划免疫的学术信息。主要栏目有述评、论著、管理、经验交流、短篇报道、综述、讲座、学术报告、学术讨论、专家访谈、文摘。

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  • 杂志名称:中国疫苗和免疫杂志
  • 主管单位:中国计划免疫
  • 主办单位:中华人民共和国卫生和计划生育委员会
  • 国际刊号:11-5517/R
  • 国内刊号:11-5517/R
  • 出版周期:双月刊
期刊荣誉:中国期刊全文数据库(CJFD)期刊收录:维普收录(中), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 文摘与引文数据库, CA 化学文摘(美), 国家图书馆馆藏, 知网收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 上海图书馆馆藏, 万方收录(中)
中国疫苗和免疫杂志2012年第05期

百日咳鲍特菌双目标基因荧光定量聚合酶链反应检测方法的建立及应用

刘勇;郭丽茹;刘鹏;黄海涛;张颖;高志刚;苏旭;陈锦英

关键词:百日咳鲍特菌, 双目标基因, 荧光定量聚合酶链反应
摘要:目的 建立以百日咳鲍特菌重复插入序列(Insertion Sequences 481 and 1002,IS481,IS1002)双目标基因检测为特点的荧光定量聚合酶链反应(Polymease Chain Reaction,PCR),用于检测百日咳鲍特菌核酸,探讨在百日咳鲍特菌诊断中的应用意义.方法 针对百日咳鲍特菌的重复IS481及IS1002基因保守区域设计特异性引物、羧基荧光素与小沟结合基团(5-CarboxyFluorescein-Aminohexyl Amidite-Minor Groove Binder,TaqMan-MGB)荧光探针,做为双目标基因检测、筛选并优化荧光定量PCR反应体系与反应条件,并通过体外克隆技术建立百日咳鲍特菌双目标基因定量分析模型.结果 引物与探针的优化浓度分别为600毫摩尔/升(mmol/L)和200mmol/L,与其他呼吸道菌均无交叉反应,具有良好的特异性.应用重组质粒绘制的标准曲线循环阈值(Cycle Threshold,Ct)与模板浓度具有良好的线性关系,方法检测灵敏度为102拷贝/微升(Copies/μl),标准曲线线性范围为103~107 Copies/μl.用荧光定量PCR检测50例百日咳病例标本,阳性45例,包括PCR方法检测阴性5份.结论 建立的双目标基因实时荧光定量PCR方法特异、敏感、快速,为百日咳鲍特菌的早期快速检测提供了技术支持.